大鼠棉球植入实验(大鼠棉球肉芽肿实验)(部分)
1.实验原理
采用棉球作为异物植入动物局部皮下,可引起与临床某些炎症后期病理变化相似的肉芽组织增生。比较给予受试样品后,实验组动物与对照组动物肉芽肿重量的差异,以确定受试样品是否具有干预慢性炎症(肉芽肿形成)的作用。
2.实验动物
推荐使用成年雄性大鼠,体重150-220克。每组8-12只。
3.实验分组
将清洁级Wisrar大鼠60只随即分为6组,分别为正常组,模型组,药物高剂量组、中剂量组和低剂量组,阳性对照组。每组10只,雌雄各半。正常组常规饲养。
4.仪器和材料
手术器械、恒温干燥箱、分析天平、注射器、碘伏、脱脂棉、脱毛器
5.实验步骤
5.1 棉球的处理 将脱脂棉制成约20~25mg紧致的小棉球,经高压灭菌后,置恒温干燥箱60°C干燥3h,取出无菌条件下称重,干燥保存,备用。
5.2 模型组大鼠麻醉,在背部切开一小口,用眼科镊子将已经承重为20mg灭菌棉球从小切口植入皮下,随即缝合,用碘液消毒后常规饲养备用。其他各实验组均同样造模。各给药组在手术次日开始给药,连续数日后处死大鼠,在原切口处切开皮肤,观察棉球肉芽肿周围血管形态,将棉球连用周围结缔组织一起取出,剔除周围脂肪组织,放烘箱中50摄氏度烘干24h,称干重。该干重减去棉球原重量即得肉芽肿干重
肉芽肿净量(mg)=干燥后棉球肉芽肿重量-原棉球重量
6.数据处理和结果判定
一般采用方差分析,但需先进行方差齐性检验,方差齐,则计算F值。若F值< F0.05,结论为各组均数间差异无显著性;若F值≥F0.05(即P≤0.05),结论为各组均数间差异有显著性,需进一步使用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计分析。对非正态分布或方差不齐的数据需进行适当的变量转换,待满足正态分布或方差齐的要求后,用转换后的数据进行统计分析;若经变量转换仍不能达到正态分布或方差齐的目的,则改用秩和检验进行统计分析。
结果判定:实验组与空白对照组比较,肉芽肿净量明显下降,经统计处理差异有显著性,可判定该受试样品大鼠棉球植入实验结果阳性。
7.注意事项
所用棉球重量及表面积对实验结果影响较大,故在实验中,应尽可能保证所用棉球重量和表面积近似。
尽量使手术切口的大小一致,以减少差异。
植入棉球后,将切口缝合牢固,以免在实验过程中棉球脱落,影响实验结果。
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