小鼠心肌缺血再灌注（I/R）模型试验
一、小鼠心肌缺血再灌注模型制备方法
1、实验动物：C57BL/6J小鼠 ，雄性，体重：22g±2g，周龄：8周，动物等级：SPF级
2、手术方法：
动物深度麻醉，确认麻醉状态后，备皮，安装好心电监护仪，消毒局部皮肤，铺洞巾后剪开肋间皮肤，钝性分离肌肉、打开心包膜，将心脏推出体外，暴露左冠状动脉前降支，用6-0无菌丝线快速结扎，打活结，看到心脏底部变白，用荷包缝法迅速关闭胸腔，挤压防止气胸，造成左室前壁心肌缺血。分别记录术前、缺血时心电图变化。
到达缺血时间以后，打开胸腔，解开活结，再次关闭胸腔，缝合肌肉皮肤，进行心肺复苏。分别记录术前、缺血时和再灌注后的心电图变化。造模成功后进行药物治疗，术后观察动物活动、采食情况。处死前对实验动物采血。术后进行心肌组织取样、TTC-Evans blue染色，进行心梗面积计算。
3、手术后护理及观察：
a.术后护理：术后单笼饲养，常规饲料及饮水。
b.观察：每天观察动物死亡或濒死情况、精神状态、行为活动、进食等。
c.伤口局部观察：术后每天1次，观察伤口有无红肿发炎等。
d.体重称量记录：术后2次/周，称重并记录体重变化情况。
二、实验操作及检测平台：
1、心肌内多点注射
2、灌胃、腹腔、尾静脉等多途径给药、大小鼠眼底静脉丛、大动物静脉采血
3、实时心电监护，输出心电图
4、动物心脏超声及数据分析
5、Micro-CT、小动物核磁成像
6、心脏TTC染色(双染)
7、心脏病理切片，HE、masson，天狼猩红染色
8、病理读片，分析梗死面积、胶原百分比
9、免疫组化、免疫荧光、凋亡(Tunel)
10、透射电镜、扫描电镜分析。
11、WB、QPCR 心梗相关血清指标检测(CK-MB等)
特点：
1、制备过程技术娴熟，最大限度的保证入组动物梗死程度均一。
2、不存在因气管切开而引起的窒息死亡。
3、创伤小，恢复快，最大限度减少人为因素对实验结果的干扰。
